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抗傷寒O血清或H型試驗(yàn)方法
本品是由傷寒桿菌 O(或 H)抗原免疫家兔獲得的抗傷寒桿菌 O(或 H)血清抗體,與傷寒桿菌 O(或 H)抗原 37℃水浴箱 18 小時(shí)測得效價(jià)。
效價(jià):1:2000
(血清按 1:2000 稀釋與菌液反應(yīng) 37 度 18h,可產(chǎn)生混濁,即反應(yīng)效價(jià) 1:4000) 1:4000
(血清按 1:4000 稀釋與菌液反應(yīng) 37 度 18h,可產(chǎn)生混濁,即反應(yīng)效價(jià) 1:8000)
試驗(yàn)方法:
1.取清潔小試管 8 支,依次編號。
2.于小試管內(nèi)各注入 0.5ml 生理鹽水。
3.先將血清進(jìn)行 1:10 稀釋,于管內(nèi)加入 1:10 稀釋的血清 0.5ml,用 1ml 吸管吹吸三次,混勻,吸出 0.5ml 注入第二管作對倍稀釋,……依次稀釋至第 7 管,棄去 0.5ml,第 8管為對照。
4.各管內(nèi)注入傷寒桿菌 O(或 H)菌液 0.5ml。
5.加完菌液后,振蕩試管架,混勻,放置 37℃水浴箱 18 小時(shí)后觀察結(jié)果??焖贆z測法:(H 抗原抗體反應(yīng))置于 50℃水浴箱 2-4 小時(shí)看結(jié)果,但其效價(jià)要比過夜觀察低 1-2 個(gè)滴度。
結(jié)果分析:
先觀察對照管,正確結(jié)果應(yīng)無凝集現(xiàn)象,再觀察各試驗(yàn)管的凝集現(xiàn)象,凝集程度以“ +"多少表示之。
(++++ )*,上液澄清,細(xì)菌全部凝集沉淀于管底。
(+++)強(qiáng),上液輕度混濁,細(xì)菌大部分凝集沉淀于管底。
(+)弱,上液混濁,細(xì)菌少部分凝集。
(-)不凝,液體呈乳狀與對照管相同。
效價(jià)判定:
以能出現(xiàn)“+ "凝集現(xiàn)象的血清高稀釋度為該血清的凝集效價(jià)。即第 1-7 管的血清終稀釋度(反應(yīng)效價(jià))分別為 1:40,1:80,1:160,1:320,1:640,1:1280,1:2560