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甘油含量試劑盒測(cè)定原理,暑期*!

發(fā)布時(shí)間: 2019-08-12  點(diǎn)擊次數(shù): 766次

甘油含量試劑盒測(cè)定原理,暑期*!

 

甘油是甘油三酯的水解產(chǎn)物。脂蛋白酯酶能水解血液中的甘油三酯;胰脂酶可以水解食物中的甘油三酯;激素敏感脂肪分解酶能水解脂肪細(xì)胞中的甘油三酯。與游離脂肪酸一樣,甘油含量是甘油三酯水解反應(yīng)的可靠檢測(cè)指標(biāo),但檢測(cè)更方便。本試劑盒采用甘油磷酸氧化酶法和經(jīng)典GPO-Trinder酶學(xué)反應(yīng)相結(jié)合的方法,通過(guò)比色法測(cè)定液體樣本中的甘油含量。經(jīng)過(guò)優(yōu)化后,操作步驟更加簡(jiǎn)單,檢測(cè)線性范圍在10-1200µmol/L,可靠性和重復(fù)性俱佳,適合生物醫(yī)學(xué)、食品實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

 

 

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*時(shí)間:2019-7-31到2019-8-31

 

原理:在ATP存在下甘油被甘油激酶磷酸化為3-磷酸甘油,再被甘油磷酸氧化酶氧化產(chǎn)生過(guò)氧化氫;在過(guò)氧化物酶作用下生色底物轉(zhuǎn)化為苯醌亞胺,其光密度值與甘油濃度成正比。

 

 

 樣本處理:

酒類(lèi)、飲品、清澈液體樣本:可直接進(jìn)行測(cè)定,如超過(guò)線性范圍可用蒸餾水或生理鹽水稀釋后再測(cè)定。

培養(yǎng)液:取不含酚紅、無(wú)顏色、無(wú)血清的細(xì)胞培養(yǎng)基,如有細(xì)胞碎片應(yīng)4ºC,,12,000g離心5min,取上清進(jìn)行測(cè)定。

血液:新鮮抗凝血,4ºC,2,000g離心5min得到血漿;非抗凝血,先4ºC靜置2h得到血清后,2000g離心10min,除去血細(xì)胞。將得到的血漿/血清70ºC 加熱10分鐘滅活內(nèi)源脂肪酶,12,000g離心10min ,取上清測(cè)定或-20ºC保存。

 

化學(xué)性質(zhì):與酸發(fā)生酯化反應(yīng),如與苯二甲酸酯化生成醇酸樹(shù)脂。與酯發(fā)生酯交換反應(yīng)。與氯化氫反應(yīng)生成氯代醇。甘油脫水有兩種方式:分子間脫水得到二甘油和聚甘油;分子內(nèi)脫水得到丙xi醛。甘油與堿反應(yīng)生成醇化物。與醛、酮反應(yīng)生成縮醛與縮酮。用稀硝酸氧化生成甘油醛和二羥基丙酮;用高碘酸氧化生成甲酸和甲醛。與強(qiáng)氧化劑如鉻酸酐、氯酸鉀或高錳酸鉀接觸,能引起燃燒或爆炸。甘油也能起硝化和乙酰化等作用。

無(wú)毒。即使飲入總量達(dá)100g的稀溶液也無(wú)害,在機(jī)體內(nèi)水解后氧化而成為營(yíng)養(yǎng)源。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,如使之飲用量時(shí),具有與醇相同的麻醉作用。

存在于烤煙煙葉、白肋煙煙葉、香料煙煙葉、煙氣中。

天然存在于煙草、啤酒、葡萄酒、可可中。

 

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