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抗血清注射途徑可根據(jù)不同抗原及試驗(yàn)要求,選用皮內(nèi)、皮下、肌肉、靜脈或淋巴結(jié)內(nèi)等不同途徑注入抗原進(jìn)行免疫。一般常采用背部、足掌·耳后等處皮內(nèi)或皮下多點(diǎn)注射。初次免疫與第二次免疫的間隔時(shí)間多為2~4周。常規(guī)免疫方案為抗原加CFA皮下多點(diǎn)注射進(jìn)行基礎(chǔ)免疫;再以免疫原加IFA作2~5次加強(qiáng)免疫,每次間隔2~3周,皮下或腹腔注射加強(qiáng)免疫。
1)常規(guī)(皮內(nèi)多點(diǎn)注射)免疫:
1一次免疫:劑量為每只兔子注射1.0 ml抗原乳劑(含抗原量1~2mg)。注射部位為兩只后腳掌的皮內(nèi)各注射0.2 ml,其余0.6 ml分多點(diǎn)注入脊柱二側(cè),頸部,腹股溝和腋窩等處淋巴結(jié)附近部位皮內(nèi),每點(diǎn)可注入0.05ml,分12點(diǎn)注入。
2第二次免疫:初次免疫后20天左右,劑量為1.0ml/只(1~2 mg/ml),加福氏不*佐劑。注射部位在腹部皮下多點(diǎn)注射,每點(diǎn)注入0.1 ml。
3第三次免疫:再次免疫后兩周內(nèi)進(jìn)行,注射劑量和部位同第二次免疫,免疫后7~14d抽取少許靜脈血,分離血清,試血測(cè)定效價(jià)。
2)淋巴結(jié)免疫:主要優(yōu)點(diǎn)是可減少用量。過(guò)程如下:
1卡價(jià)苗致敏:免疫前足掌皮下每側(cè)各注入活卡價(jià)苗(75 mg/ml)0.3 ml。10天左右觀察兩側(cè)腘窩淋巴結(jié),一般可腫脹如蠶豆大小,此時(shí)即可進(jìn)行淋巴結(jié)內(nèi)免疫注射。
2一次免疫:用手淋巴結(jié)后在兩側(cè)腘窩淋巴結(jié)內(nèi)各注入抗原乳劑0.25ml,每只兔總量0.5 ml;為加強(qiáng)免疫,于初次免疫20天后,于腹部皮下多點(diǎn)注射不加佐劑抗原溶液1mg/1ml。
3二周后可如同一次免疫的劑量和途徑再注射一次,一般可在第三次免疫注射前試血滴定效價(jià),效價(jià)如已達(dá)到要求可不必進(jìn)行第三次免疫。
有條件的情況下,免疫后要加強(qiáng)動(dòng)物飼料管理,如給熟黃豆飼養(yǎng)等。
3)腹腔免疫:一般不必加佐劑,適用于細(xì)胞性或顆粒性抗原,而且抗原性較強(qiáng)者,例如用綿羊紅細(xì)胞免疫家兔或小鼠即可用此法。