尼氏染色液（硫堇法）

一、尼氏體與尼氏染色液

尼氏體（Nissl body），或稱尼氏小體，是分布于神經(jīng)細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)的三角形或橢圓形小塊狀物質(zhì)。它能被堿性染料如硫堇、亞-甲藍(lán)、甲苯胺藍(lán)和焦油紫等染成紫藍(lán)色。尼氏染色液（Nissl Stain，硫堇法）正是利用硫堇這種堿性染料對(duì)尼氏體進(jìn)行染色的試劑。

二、尼氏染色液（硫堇法）的組成與特點(diǎn)

尼氏染色液（硫堇法）主要由磷酸鹽、硫堇等組成。它的主要特點(diǎn)包括：

操作簡(jiǎn)便：染色步驟相對(duì)簡(jiǎn)單，易于掌握。

染色穩(wěn)定：染色效果穩(wěn)定，重復(fù)性好。

適用范圍廣：可用于石蠟組織切片的尼氏物質(zhì)、神經(jīng)元等的染色。

三、尼氏染色液（硫堇法）的染色步驟

尼氏染色液（硫堇法）的染色步驟通常包括：

固定：新鮮組織固定于10%甲醛液中，常規(guī)脫水包埋。

切片：石蠟切片厚8~15μm，常規(guī)脫蠟至水。

染色：將切片置于預(yù)熱至5060℃的尼氏染色液中浸染3060分鐘。

分化：用蒸餾水稍洗后，用95%乙醇迅速分化，直至切片清晰，背景呈淡藍(lán)色或無色。

脫水與封固：無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。

四、尼氏染色液（硫堇法）的染色結(jié)果

染色后，尼氏小體呈紫藍(lán)色，細(xì)胞核呈淡藍(lán)色，背景無色或淺藍(lán)色。這樣的染色結(jié)果有助于清晰地觀察神經(jīng)細(xì)胞中尼氏體的形態(tài)和分布。

五、注意事項(xiàng)

尼氏體易溶解：尼氏體離體后容易溶解，因此組織取出后應(yīng)立即固定，否則難以著色。

固定作用重要：組織固定起著非常重要的作用，固定可采用乙醇或中性福爾馬林溶液。

染色液預(yù)熱：染色液需提前預(yù)熱至50~60℃，放入切片后開始計(jì)算染色時(shí)間。

分化要迅速：95%乙醇分化應(yīng)迅速進(jìn)行，肉眼觀察至切片清晰，背景呈淡藍(lán)色或無色為適宜

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